當(dāng)建立產(chǎn)品的無菌檢查法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法的驗(yàn)證，以證明所采用的方法適合于該產(chǎn)品的無菌檢查。若該產(chǎn)品的組分或原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變時(shí)，檢查方法應(yīng)重新驗(yàn)證。

      驗(yàn)證時(shí)，按“供試品的無菌檢查”的規(guī)定及下列要求進(jìn)行操作。對每一試驗(yàn)菌應(yīng)逐一進(jìn)行驗(yàn)證。

      菌種及菌液制備 除大腸埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B) 4 4102〕外，*、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉同培養(yǎng)基靈敏度檢查。大腸埃希菌的菌液制備同*。

      薄膜過濾法 取每種培養(yǎng)基規(guī)定接種的供試品總量按薄膜過濾法過濾，沖洗，在后一次的沖洗液中加入小于100 cfu 的試驗(yàn)菌，過濾。取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或改良馬丁培養(yǎng)基中，或?qū)⑴囵B(yǎng)基加至濾筒內(nèi)。另取一裝有同體積培養(yǎng)基的容器，加入等量試驗(yàn)菌，作為對照。置規(guī)定溫度培養(yǎng)3～5 天，各試驗(yàn)菌同法操作。

     直接接種法  取符合直接接種法培養(yǎng)基用量要求的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8 管，分別接入小于100 cfu 的*、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2 管，取符合直接接種法培養(yǎng)基用量要求的改良馬丁培養(yǎng)基4 管，分別接入小于100 cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2 管。其中1 管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定量的供試品量，另1 管作為對照，按置規(guī)定的溫度培養(yǎng)3～5 天。

     結(jié)果判斷  與對照管比較，如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長良好，則說明供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下無抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計(jì)，照此檢查方法和檢查條件進(jìn)行供試品的無菌檢查。 如含供試品的任一容器中的試驗(yàn)菌生長微弱、緩慢或不生長，則說明供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下有抑菌作用，可采用增加沖洗量、增加培養(yǎng)基的用量、使用中和劑或滅活劑、更換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并重新進(jìn)行方法驗(yàn)證試驗(yàn)。

驗(yàn)證試驗(yàn)也可與供試品的無菌檢查同時(shí)進(jìn)行。