● 稀釋針頭和稀釋液瓶過酒精燈火焰消毒，稀釋針頭插到稀釋液瓶
里，開機，將稀釋液倒置，把稀釋液注入樣品瓶中，樣品瓶中稀釋液加滿后，放下稀釋液瓶，再倒置樣品瓶，使溶解后的供試品通過培養(yǎng)期進行集菌，(重復(fù)操作每個樣品的過濾程序)
● 完成集菌后，對培養(yǎng)器里的抑菌成份進行沖洗，加沖洗液前，先將濾帽取下，再加入沖洗液(加至美杯體100ml)，并同時振蕩一次性培養(yǎng)器，使抑菌成份充分沖洗掉。蓋上濾帽，將沖洗液濾出。
● 根據(jù)每種樣品的抑菌成份的濃度，用戶按照2005版《中國藥典》驗證方法來確定沖洗量。
● 沖洗完畢后，開啟已滅菌好的培養(yǎng)基瓶，將針頭插入培養(yǎng)基瓶中。
摘下一次性培養(yǎng)其頂部濾器開口的膠塞，套在一次性培養(yǎng)器的底口上，用軟管夾子依次開閉軟管，開啟集菌儀，將培養(yǎng)基注入的培養(yǎng)器內(nèi)。(先取兩個夾子夾住彈性軟管定位處的兩根管子，先加入改良馬丁培養(yǎng)基；再取另外一個夾子夾住另外一根管子，并拔去先前的兩個夾子，加入硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基)。
● 子夾閉與一次性培養(yǎng)器連接部的軟管，留出5-6cm軟管，剪除其余部分，并將開口端插在空氣濾器的開口上。
● 按照藥典規(guī)定的培養(yǎng)時間進行培養(yǎng)。
● 情況，若需取樣分離培養(yǎng)，可將軟管消毒，用無菌注射器插入軟管抽取所需量做進一步檢查。
純凈水、注射用水、上清水、口服液等的薄膜過濾方法
1、取濾膜(直徑50mm)N張浸泡在純化水里約5分鐘
2、用鑷子取出濾膜平貼在不銹鋼網(wǎng)片上，將不銹鋼網(wǎng)片放入不銹剛底轉(zhuǎn)速：0-240轉(zhuǎn)/分座里，放入墊片和O型圈，將螺蓋和杯體蓋緊組裝成一套完整的全封閉過濾培養(yǎng)器。
3、滅菌，用牛皮紙將組裝好的培養(yǎng)器包好，放入高壓濕熱滅菌鍋里進行滅菌(按照2005年中國藥典)的規(guī)定進行滅菌。
4、取滅菌好的培養(yǎng)器至為微生物限度檢定室，進行集菌過濾。
5、打開配置好的固體培養(yǎng)基，將集菌好的濾膜平貼在培養(yǎng)基上(濾膜上不可以有氣泡產(chǎn)生)。
6、按照中國藥典的規(guī)定進行培養(yǎng)。
注意：
1.液層高度的控制方法：取下濾器頂部膠帽，向濾器內(nèi)泵入沖洗液，沖洗液至適宜高度時，套上膠帽
2.沖洗時，若出現(xiàn)濾膜上無液層覆蓋現(xiàn)象，說明濾器內(nèi)氣壓過高，取下膠帽放氣，然后套上。
3.應(yīng)保持雙芯針頭空氣過濾內(nèi)的濾膜的干燥，可確保其留意暢通。
4.根據(jù)樣品性狀，控制集菌儀適宜轉(zhuǎn)速，以進液管不出現(xiàn)氣泡為宜。若進液管出現(xiàn)氣泡，將低轉(zhuǎn)速既可避免，否則應(yīng)檢查針頭是否被堵塞。
5.為便于操作，推薦選用帶膠塞的500ml玻璃吸濕器。
6.未盡事宜請參考《中國藥典》附錄“無菌檢查法和微生物限度檢查發(fā)”章節(jié)
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