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原多甲藻酸AZA1標(biāo)準(zhǔn)品CRM-AZA1-b 的制備

AZA 1是從2005年在無(wú)殼貝類(lèi)組織中分離得到的，在愛(ài)爾蘭海洋研究所進(jìn)行了AZA 1的制備和純化，并在哈利法克斯國(guó)家研究委員會(huì)進(jìn)行了最終的清洗和純度檢驗(yàn)。AZA 1的結(jié)構(gòu)和純度經(jīng)NMR和LC-MS/MS確證，未檢測(cè)到明顯的雜質(zhì)，對(duì)AZA 1的[M+H]*進(jìn)行了高分辨率質(zhì)譜測(cè)定，測(cè)得的準(zhǔn)確質(zhì)量為842.5037+/-0.0004(A=-1.5ppm)。圖1顯示了高分辨率的MS產(chǎn)物離子光譜。

以純AZA 1為原料，在CD：OH中溶解，制得原液，用于定量核磁共振。以高純甲醇為原料，對(duì)qNMR原液進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋?zhuān)频?strong style="font-family: 微軟雅黑; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);">原多甲藻酸AZA1標(biāo)準(zhǔn)品CRM-AZA1-b溶液。該溶液與聚四氟乙烯攪拌棒和磁混合器完.全混合，在氬氣氣氛下在冰浴中冷卻。假藥被分配到干凈的氬氣過(guò)濾玻璃安瓿中，然后立即被火焰封住。

原多甲藻酸( azaspiracils AZA)貝類(lèi)毒素是20世紀(jì)90年代于歐洲發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)新型聚醚類(lèi)生物毒素,由原多甲藻(Properidin inm crassipes )產(chǎn)生",具有獨(dú).特的6,56三螺環(huán)和環(huán)胺結(jié)構(gòu)(如圖1所示)。人食用含有AZA的貝類(lèi)后會(huì)出現(xiàn)惡.心、嘔吐、腹瀉、胃痙攣等癥狀，與腹瀉性貝毒素( d ia rhet-ic shellfish po ison ing DSP)中毒癥狀非常相似;而

AZA的作用時(shí)間更久，中毒后的恢復(fù)期更長(zhǎng),是一類(lèi)比DSP危害更大的毒素。2004年,由聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織、世界衛(wèi)生組織和政府間海洋委員會(huì)共同組建的雙殼軟體生物毒素工作組將AZA毒素歸為8大類(lèi)貝類(lèi)毒素之一，歐盟立法機(jī)構(gòu)確立雙殼軟體動(dòng)物中AZA (AZA1~AZA3)的最大檢出限（LOD)是160  gAkg (以貝肉計(jì))"4。在我國(guó)的某些海域已發(fā)現(xiàn)有多種原多甲藻的分布；世界貿(mào)易的頻繁交流也導(dǎo)致有毒原多甲藻隨船舶壓艙水進(jìn)入我國(guó)的可能性大大增加，具有污染我國(guó)貝類(lèi)產(chǎn)品的潛在威脅。因此,建立AZA貝類(lèi)毒素的檢測(cè)方法并對(duì)AZA進(jìn)行監(jiān)控,對(duì)提高我國(guó)水產(chǎn)品安全水平，保護(hù)消費(fèi)者健康具有積極意義。

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