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島津應(yīng)用數(shù)據(jù)集　　

色譜分析 LCMSMS-214
　　
LCMS-8030 定性鑒別阿膠藥材
　　
摘要：本文建立了一種使用島津液相色譜儀 LC-20A 和三重四極桿質(zhì)譜儀 LCMS-8030
　　
聯(lián)用定性鑒別阿膠藥材的方法。本文參照《中國藥典（2015 版）》中阿膠項下，使用胰蛋白酶酶解阿膠樣品，選擇阿膠的特征肽作為定性依據(jù)；按照藥典要求建立了 m/z539.8>612.4
　　
和 m/z539.8>923.8 檢測離子對，且對照品溶液及市售藥材樣品中阿膠特征肽的信噪比均遠遠大于 3:1。該方法*藥典的要求，實現(xiàn)阿膠藥材的快速、準確、靈敏的定性分析。
　　
關(guān)鍵詞：液相色譜 三重四極桿質(zhì)譜 阿膠 特征肽段
　　
膠類藥材是具有典型民族特色的傳統(tǒng)中藥，為動物的皮熬制而成的明膠類物質(zhì)。 阿膠系驢皮經(jīng)煎煮濃縮成的固體膠，能補血滋陰、潤燥止血，用于貧血心悸、燥咳咯血、先兆流產(chǎn)、產(chǎn)后血虛、肌痿無力， 是中醫(yī)臨床常用補益藥。阿膠經(jīng)水解后其膠原蛋白變?yōu)榉肿恿扛〉碾念悾瑥亩ピ心z原 
　　
蛋白的性質(zhì)，無法進行來源鑒別。2015 版藥典對阿膠的定性方法進行了修訂，由 2010版的茚三酮顯色法修改為采用液質(zhì)聯(lián)用的方法檢測特征肽段，方法更科學(xué)可靠。本文利用島津三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng) LCMS-8030 對阿膠中的特征肽段進行了分析，建立了阿膠定性鑒別分析方法，可為該類樣品的分析提供參考。
　　
1. 實驗部分
　　
1.1 儀器
　　
島津液相色譜儀 LC-20A 與三重四極桿質(zhì)譜儀 LCMS-8030 聯(lián)用系統(tǒng)。具體配置為
　　
LC-20AD×2 輸液泵，DGU-20A3 在線脫氣機，SIL-20AC 自動進樣器，CTO-20A 柱溫箱，
　　
CBM-20A 系統(tǒng)控制器，LCMS-8030 三重四極桿質(zhì)譜儀，LabSolutions Ver. 5.60SP2 色譜工作站。
　　
1.2 分析條件液相條件
　　
色譜柱：Inertsil ODS-4 (2.1 mm I.D.×250 mm L., 5 µm)
　　
流動相：A 相-0.1% 甲酸水溶液 流速：0.3 mL/min
　　
B 相-乙腈 柱溫：40℃
　　
作者：孫謙 西安分析中心 :
　　
進樣量：5 µL
　　
洗脫方式：梯度洗脫，B 相初始濃度為 5%，洗脫程序見表 1?！?/p>

1.3 對照品和樣品配制及前處理方法
　　
取對照藥材或待測樣品粉末 0.1 g，加 1% NH4HCO3 溶液 50 mL，超聲處理 30 min，使用微孔濾膜濾過。參照《中國藥典（2015 版）》阿膠項下，取濾液 100 µL，置于進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析純胰蛋白酶適量，加 1% NH4HCO3 溶液溶解，制成每 1 µL 中含 1 mg 胰蛋白酶的溶液）10 µL，搖勻，37℃恒溫酶解 12 h，作為對照藥材溶液或供試液，進 LCMS-8030 分析。
　　
2．結(jié)果與討論
　　
2.1 阿膠對照藥材的 MRM 色譜圖

3. 結(jié)論
　　
本文建立了一種使用島津三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀 LCMS-8030 鑒定阿膠中特征肽段，實現(xiàn)了阿膠定性鑒別的方法。該方法所檢測阿膠特征肽段MRM 色譜圖中離子對539.8>612.4， 539.8>923.8 的響應(yīng)明顯，* 2015 版藥典要求色譜峰信噪比大于 3:1 的要求，市售阿膠藥材樣品分析結(jié)果表明所測樣品中含有阿膠成分。因此，本方法可為應(yīng)對藥典要求實現(xiàn)阿膠藥材的快速、準確、靈敏的定性鑒別提供參考。
　　
　　

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