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NIST SRM 2374 用于外部RNA控制的DNA序列庫

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NIST SRM 2374 用于外部RNA控制的DNA序列庫旨在用作使用體外轉(zhuǎn)錄 (IVT) 進行核糖核酸 (RNA) 對照合成的模板。這些 RNA 對照旨在用作外部對照或“加標”對照,通過對基因表達測量的技術(shù)性能進行定量評估來支持基因表達測定的可信度。

一個 SRM 單元包含 96 個不同的 0.5 mL 聚丙烯管,其中通過吸光度 (A260) 測量,每個脫水質(zhì)粒脫氧核糖核酸 (DNA) 約為 10 µg。每個試管都含有質(zhì)粒 DNA,其具有*的模板序列,用于不同的外部 RNA 對照。這些控制是與外部 RNA 控制聯(lián)盟 (ERCC) 合作開發(fā)的。


NIST SRM 2374 用于外部RNA控制的DNA序列庫這些模板可以很容易地用于制作 RNA 控制(參見圖 1)。根據(jù)轉(zhuǎn)錄的鏈,對照將模擬“有義”或“反義”真核信使 RNA (mRNA)。當用于制造有義對照 RNA 時,每個對照在 3' 端將有一個標稱的 24 個核苷酸 (nt) 多聚腺苷酸 (polyA) 片段。由它們產(chǎn)生的 DNA 模板和 RNA 轉(zhuǎn)錄本在圖 2 和圖 3 中進行了注釋和描述。對照序列范圍從 273 nt 到 2022 nt,GC 分數(shù) (1) 有兩種群體分布,一種以 35% GC 為中心,另一種以 47% 為中心。

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