MTT/細(xì)胞毒性/增殖檢測(cè)試劑盒
英文名稱：MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
規(guī)格：500T ; 1000T
儲(chǔ)存條件：-20℃，避光，有效期1年
單位：盒

MTT/細(xì)胞毒性/增殖檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 

       MTT 可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物 formazan，在特定溶劑存在的情況下，可以被溶解，然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定 490nm 波長(zhǎng)附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。 

使用說(shuō)明：  

      1.收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，分于 96 孔板，每孔 180μL，3000-10000 個(gè)細(xì)胞/孔。 

      2.置 37℃、5%CO2 溫箱培養(yǎng)使細(xì)胞貼壁，培養(yǎng) 6-24 小時(shí)。 

      3.加入適當(dāng)濃度的受試化合物，繼續(xù)培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間。 

      4.小心吸去上清，加入 90μL 新鮮培養(yǎng)液，再加入 10μL MTT 溶液，繼續(xù)培養(yǎng) 4 h。 

      5.然后吸掉上清，每孔加入 110μL Formazan 溶解液，置搖床上低速振蕩 10 min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀 490 nm 處測(cè)量各孔的吸光值。 

      6.同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、 Formazan 溶解液），對(duì)照孔（細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan 溶解液），每組設(shè)定 3 復(fù)孔。 

MTT/細(xì)胞毒性/增殖檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)： 

       1.由于使用 96 孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面，由于96 孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā)，可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法，改加 PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 

       2.MTT 溶液為黃色需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。Formazan 溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以 37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。 

       3.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。