膠原酶V 常用溶液
別名-Clostridiopeptidase A
英文名稱(chēng)-Collagenase Ⅴ
CAS 9001-12-1
規(guī)格-100mg 1g
外觀（性狀） 深褐色粉末
儲(chǔ)存條件 -20℃
有效期 2年
單位 瓶
酶活/效價(jià) 125 CDU/mg sold
溶解性 5 mg/mlWater
來(lái)源 From clostridium histolyticum

膠原酶V 常用溶液

膠原酶V 常用溶液產(chǎn)品說(shuō)明： 

膠原酶Ⅴ包含至少 7 種蛋白酶成分，分子量從 68-130KD 不等。它可用于胰腺小島組織的分離，將結(jié)締組織分離成單個(gè)細(xì)胞。消化軟骨組織的濃度一般為 1-2 mg/ml，消化肝臟組織大約 1 mg/ml。但是具體的消化濃度因種屬特異性而異。很多文獻(xiàn)指出膠原酶可以消化多種組織，膠原酶的使用濃度一般為 0.1- 5 mg/ml，消化過(guò)程中可以攪拌以促進(jìn)酶的消化作用。膠原酶在消化的過(guò)程中可以引起細(xì)胞的少量死亡，一般消化時(shí)間為 15min 至數(shù)小時(shí)。如果濃度發(fā)生變化那么消化時(shí)間可能更長(zhǎng)。消化過(guò)程中緩沖液為含鈣離子和 BSA 的 Krebs Ringer Buffer。 

在消化的過(guò)程中如果細(xì)胞大量死亡則需要降低酶量，同時(shí)可以加入0.5%BSA或5-10%血清來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞的狀態(tài)和消化效果。膠原酶的滅菌首先離心或者用0.8μm的濾器去掉不溶物。然后再用0.2μm的濾器過(guò)濾除菌。 

對(duì)于組織培養(yǎng)方面的應(yīng)用，膠原酶可以用不含鈣離子的溶液配制如hanks，ebss等。

酶保存液：0.05 - 0.1 mg/ml 膠原酶溶于50 mM TES buffer，pH 7.4 (37 ℃) 含 0.36 mM 氯化鈣。反應(yīng)體系的終濃度為50 mM TES，0.36 mM 氯化鈣，25 mg 膠原，0.005-0.01 mg 膠原酶。 

穩(wěn)定性：酶液在含有 0.3-0.5 mM 鈣離子的中性 PH 條件下可以在 37 ℃維持活性 5 小時(shí)。在-20℃可以維持?jǐn)?shù)月。