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【儀器網(wǎng) 行業(yè)應(yīng)用】一般在實(shí)際使用超臨界流體色譜時，根據(jù)物質(zhì)性質(zhì)以及操作條件的不同，超臨界流體色譜具有不同的分離方法。一般利用超臨界流體色譜分離藥物時，會分為直接分離法以及間接分離法。以下根據(jù)網(wǎng)上查詢資料，對超臨界流體色譜分離方法進(jìn)行整合：
1.直接分離法：超臨界流體色譜分離方法中的直接分離法可分為手性流動相添加法以及手性固定相法。
手性流動相添加劑法：手性流動相添加劑法為手性添加劑吸附到固定相表面形成非對映體復(fù)合物，該立體反應(yīng)發(fā)生在流動相中，包括手性包含復(fù)合法、手性配合交換法和手性離子對色譜法。
手性包含復(fù)合法經(jīng)常采用的添加劑是環(huán)糊精與手性冠醚。環(huán)糊精對疏水性和親水性藥物對映體都具有很強(qiáng)的包合作用。此法采用的固定相常為苯基與硅膠等。檢測方法多用電導(dǎo)檢測法。
手性配合交換法是將手性金屬配合劑加入流動相中形成三元非對映體配合物，此配合物與固定相發(fā)生立體選擇性吸引或排斥反應(yīng)，因其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和能量的差異，使對映體得以分離。配合交換系統(tǒng)使用反相柱、疏水性固定相、水性流動相和UV檢測系統(tǒng)。溶質(zhì)疏水性增加，保留時間延長。
手性離子對色譜法是在流動相中加入反離子，使之與流動相中的對映體生成非對映的離子對復(fù)合物。因離子對復(fù)合物與固定相發(fā)生靜電，疏水或氫鍵作用產(chǎn)生差速遷移而得以分離。
手性流動相添加劑法分析過程較少發(fā)生消旋化，添加劑選擇的范圍也寬，但添加劑在固定相表面的動態(tài)吸附平衡時間長，致使添加劑消耗大。
手性固定相法：手性固定相法是通過使用一個具有光學(xué)活性的環(huán)境即手性固定相來提供拆分所需要的手性中心。
2.間接分離法：間接分離法主要是指手性衍生化試劑法。而所謂手性衍生化試劑法，是指先將手性衍生化試劑與藥物外消旋體反應(yīng)，通過共價(jià)結(jié)合后在對映體分子中引入另一個手性中心，形成非對映體，再在非手性柱上分離的方法。手性衍生化試劑法應(yīng)用的手性化合物對映體的化學(xué)結(jié)構(gòu)中應(yīng)具有易于衍生化的基團(tuán)，如氨基、羧基、羥基或巰基等。手性試劑除了和反應(yīng)產(chǎn)物須有穩(wěn)定的化學(xué)和手性性質(zhì)，還須具有高的化學(xué)和光學(xué)純度，在貯存中不發(fā)生改變。
超臨界流體色譜法，作為目前較為前沿的分析分離技術(shù)，在工業(yè)、醫(yī)藥業(yè)以及相關(guān)行業(yè)的應(yīng)用較廣，因此對超臨界流體色譜分離方法進(jìn)行深入了解是有價(jià)值的。上述為不全面歸納，如有遺漏錯誤，歡迎補(bǔ)充。
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