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【儀器網(wǎng) 行業(yè)應(yīng)用】超微量分光光度計是一類很重要的分析儀器,在物理化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)、化工冶金等生產(chǎn)管理部門都有廣泛而且重要的應(yīng)用。超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,常用于核酸、蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度等的定量。
常見應(yīng)用:
1、核酸的定量:核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。其可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈DNA、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波長為260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)消光因子。
2、UV-VIS常規(guī)可見-紫外檢測:全波長超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見分光光度計一樣行使功能。
3、蛋白質(zhì)的直接定量(UV法):這種方法是在280nm波長直接測試蛋白。蛋白質(zhì)測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質(zhì)的干擾,如DNA干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。
4、比色法蛋白質(zhì)定量:蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,比色法測定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸如*、*等與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng),產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
5、細(xì)菌細(xì)胞密度測定:實驗室確定細(xì)菌生長密度和生長期,多根據(jù)經(jīng)驗和目測推斷細(xì)菌的生長密度。在遇到要求較高的實驗,需要采用分光光度計準(zhǔn)確測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
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