FKM(Fluorescence Kinetic Microscope)多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)是目前功能強(qiáng)大全面的植物顯微熒光研究?jī)x器,是基于FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)的顯微成像定制系統(tǒng)。它由包含可擴(kuò)展部件的增強(qiáng)顯微鏡、高分辨率CCD相機(jī)、激發(fā)光源組、光譜儀、控溫模塊以及相應(yīng)的控制單元和專用的工作站與分析軟件組成。它不僅可以進(jìn)行微藻、單個(gè)細(xì)胞、單個(gè)葉綠體乃至基粒-基質(zhì)類囊體片段進(jìn)行Fv/Fm、Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、熒光淬滅、OJIP快速熒光響應(yīng)曲線、QA再氧化等各種葉綠素?zé)晒饧癕CF多光譜熒光(multicolor fluorescence)成像分析;還能通過(guò)激發(fā)光源組進(jìn)行進(jìn)行任意熒光激發(fā)和熒光釋放波段的測(cè)量,從而進(jìn)行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等熒光蛋白、熒光染料以及藻青蛋白、藻紅蛋白、藻膽素等藻類熒光色素的成像分析;更可以利用光譜儀對(duì)各種熒光進(jìn)行光譜分析,區(qū)分各發(fā)色團(tuán)(例如PSI和PSII及各種捕光色素復(fù)合體等)并進(jìn)行深入分析。
FKM多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)使熒光成像技術(shù)真正成為光合作用機(jī)理研究的探針,使科研工作者在藻類和高等植物細(xì)胞與亞細(xì)胞層次深入理解光合作用過(guò)程及該過(guò)程中發(fā)生的各種變化,為直接研究葉綠體中光合系統(tǒng)的工作機(jī)理提供了有力的工具。FKM作為藻類/植物表型和基因型顯微研究的雙重利器,得到了學(xué)界的廣泛認(rèn)可并取得了大量的科研成果。
功能特點(diǎn)
?內(nèi)置現(xiàn)今葉綠素?zé)晒庋芯康娜砍绦?,如Fv/Fm、Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、熒光淬滅、OJIP快速熒光響應(yīng)曲線、QA再氧化等,可獲得70余項(xiàng)參數(shù)。
?配備10倍、20倍、40倍、63倍和100倍專用生物熒光物鏡,可以清晰觀測(cè)到葉綠體及其發(fā)出的熒光。
?激發(fā)光源組中包括紅外光、紅光、藍(lán)光、綠光、白光、紫外光和遠(yuǎn)紅光等,通過(guò)紅藍(lán)綠三色光還可以調(diào)出可見(jiàn)光譜中的任何一種色光,能夠研究植物/藻類中任何一種色素分子或發(fā)色團(tuán)。
?可進(jìn)行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等熒光蛋白、熒光染料的成像分析
?高分辨率光譜儀能夠深入解析各種熒光的光譜圖。
?控溫系統(tǒng)可以保證實(shí)驗(yàn)樣品在同等溫度條件下進(jìn)行測(cè)量,提高實(shí)驗(yàn)精度,也可以進(jìn)行高溫/低溫脅迫研究。
應(yīng)用領(lǐng)域
?微藻、大型藻類/高等植物的單個(gè)細(xì)胞、單個(gè)葉綠體、基粒-基質(zhì)類囊體片段等的顯微結(jié)構(gòu)植物光合生理研究
?藻類/植物逆境研究
?生物和非生物脅迫的研究
?藻類/植物抗脅迫能力及易感性研究
?突變體篩選及光合機(jī)理研究
?藻類長(zhǎng)勢(shì)與產(chǎn)量評(píng)估
?藻類色素與光合作用關(guān)系
?藻類/植物——微生物交互作用研究
?藻類/植物——原生動(dòng)物交互作用研究
?基因工程與分子生物學(xué)研究
測(cè)量樣品
?植物活體切片
?植物表皮
?植物細(xì)胞
?綠藻、藍(lán)藻等各種單細(xì)胞和多細(xì)胞微藻
?葉綠體提取液
?類囊體提取液
?含有葉綠體的原生動(dòng)物
工作原理
FKM分析過(guò)程中,通過(guò)連接在顯微鏡上的激發(fā)光源組和內(nèi)置在6位濾波輪中的一系列濾波器、分光鏡激發(fā)植物樣品中各種發(fā)色團(tuán)的動(dòng)態(tài)熒光。樣品激發(fā)出的熒光經(jīng)顯微鏡放大后進(jìn)行熒光光譜分析和熒光動(dòng)力學(xué)成像分析。SM 9000光譜儀通過(guò)光纖與顯微鏡連接,以進(jìn)行激發(fā)熒光光譜分析。安裝在顯微鏡頂部的高分辨率CCD相機(jī)則用于熒光動(dòng)力學(xué)成像分析。全部工作過(guò)程通過(guò)工作站和控制單元按照預(yù)先設(shè)定好的程序自動(dòng)進(jìn)行。測(cè)量過(guò)程中,可通過(guò)溫控模塊調(diào)控藻類、植物細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)樣品的溫度。蠕動(dòng)泵可以實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)藻類的連續(xù)測(cè)量。
儀器組成
1.增強(qiáng)顯微鏡
2.高分辨率CCD相機(jī)
3.激發(fā)光源組
4.SM 9000光譜儀
5.主控制單元
6.工作站及軟件
7.控溫模塊的控制單元
8.6位濾波輪