PCR前的核酸提取過程操作復(fù)雜，耗時(shí)、好禮，難以實(shí)現(xiàn)高通量操作，且易造成實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。本公司給予*的Direct Lysis試劑，開發(fā)了組織細(xì)胞直接擴(kuò)增技術(shù)，可不用提取核酸，對組織或細(xì)胞樣本簡單處理后，直接進(jìn)行PCR、RT-PCR、qPCR以及RT-PCR。該系列試劑盒可廣泛應(yīng)用于基因克隆、轉(zhuǎn)基因或基因敲除鑒定、基因表達(dá)分析、病毒診斷等PCR相關(guān)的各種實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
低樣本量：樣品用量小，20-40ul即可滿足需求
快捷：30min內(nèi)制備模板，無需其他設(shè)備
高效：經(jīng)反復(fù)驗(yàn)證，可有效擴(kuò)增組織細(xì)胞中長達(dá)1800bp的DNA和RNA的片段
直接：無需柱純化、步驟簡單，降低氣溶膠產(chǎn)生
高通量：能夠在96孔板或8聯(lián)管中操作
RNA direct：RNA也可進(jìn)行直接擴(kuò)增，同類產(chǎn)品少，且對比競品效果優(yōu)
產(chǎn)品名稱：EZ®細(xì)胞及動(dòng)物組織DNA直擴(kuò)PCR試劑盒
英文名稱：EZ Cell and Tissue DNA Direct PCR Kit
產(chǎn)品貨號：EZ010-01/EZ010-02
產(chǎn)品規(guī)格：50T/200T
產(chǎn)品價(jià)格：420/1350元
試劑盒應(yīng)用：
動(dòng)物組織或細(xì)胞DNA的擴(kuò)增與克隆、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞株篩選、DNA病毒基因擴(kuò)增、DNA病毒普通PCR診斷、DNA病毒Real-time PCR診斷（Taqman法）等。
試劑盒組成：
DNA-EZ-1、DNA-EZ-2、DNA-EZ-3、2×TaqMix、H2O
保存條件：
-20ºC保存。使用前將DNA-EZ-1、DNA-EZ-3在室溫或37ºC充分溶解。DNA-EZ-2和2×TaqMix需置于冰上。
EZ®細(xì)胞及動(dòng)物組織DNA直擴(kuò)PCR試劑盒使用方法：
1、細(xì)胞或組織樣品中DNA的擴(kuò)增
1 將DNA-EZ-1與DNA-EZ-2以5：1的比例充分混合。
2 取20 µL細(xì)胞樣品（105-106 cells/mL）或研磨的組織樣品，加入6 µL上述混合液，混勻。
3 置于50ºC靜置10分鐘后，再置于95ºC加熱10分鐘。
4 加入50 μL的DNA-EZ-3，混勻。
5 取2 μL上述處理液進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
2、組織塊中DNA的擴(kuò)增
1 用H2O將DNA-EZ-1稀釋5倍，每25 μL的DNA-EZ-1稀釋液加入1 μL的DNA-EZ-2，混合均勻。
2 切取半顆米粒大小的組織塊（< 3 mm3），并*浸入上述混合液中。
3 50ºC加熱30分鐘，每隔10分鐘取出混勻一次。
4 95ºC加熱10分鐘。
5 加入50 μL的DNA-EZ-3，混勻。
6 取2 μL上述處理液進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
3、Real-time PCR
取上述細(xì)胞或組織處理液，加入特異性引物和Taqman探針，可進(jìn)行特異性靶標(biāo)DNA的定量檢測。
取上述細(xì)胞或組織處理液，加入SYBR Green PCR試劑（需自備），可進(jìn)行特異性靶標(biāo)DNA的相對定量檢測。
4、PCR加樣體系
成分 | 25 μL體系（*） | 50 μL體系 |
2×TaqMix | 12.5 μL | 25 μL |
Forward Primer (10 μM) | 1 μL | 2 μL |
Reverse Primer (10 μM) | 1 μL | 2 μL |
Template DNA | 2 μL | 2 μL |
H2O | 8.5 μL | 19 μL |
